Tecniche per Subcoltura linee cellulari

March 28

Tecniche per Subcoltura linee cellulari


Gli scienziati mantengono una grande varietà di cellule in laboratorio da aggiungere alla nostra comprensione di come le cellule crescono, si moltiplicano e muoiono. Per mantenere le cellule, gli scienziati si dividono periodicamente - sottocultura o dividere - loro in terreno di coltura fresco.

Subculture

Le cellule sono coltivate in sospensione in terreno di coltura o collegato a piastre Petri di plastica o fiaschi. Come le cellule crescono diventano più dense, utilizzare le sostanze nutritive ed espellere i prodotti di scarto nel mezzo. Pertanto, le cellule devono essere divisi regolarmente in numeri più piccoli e dato mezzo fresco - solitamente ad un numero specifico di cellule per piatto.

metodo

Contare e diluire le cellule sospese in un mezzo fresco. Per le cellule attaccate, rimuovere medio speso e lavare delicatamente le cellule con un tampone di soluzione salina. Esporre le cellule a una soluzione enzimatica o sale di rompere le connessioni cellula-cellula e cellula-piatto - tripsina è più comunemente usato. Arrestare la reazione enzimatica con l'aggiunta di siero animale, mix cella posto in un tubo e di spin in una centrifuga. Rimuovere liquido, risospendere delicatamente le cellule in un mezzo fresco, contare e li disperdono alla densità desiderata.

considerazioni

cellule Subculture in un ambiente sterile, con attrezzature sterili per evitare la contaminazione batterica o fungina. Densità delle cellule, la quantità di tempo in tripsina e frequenza subcultura sono tutti dipendenti dal tipo di cellula. Utilizzare un microscopio per monitorare regolarmente le cellule.