Protocollo per NIH 3T3

October 17

Protocollo per NIH 3T3


cellule NIH3T3 sono ampiamente utilizzati nei laboratori di ricerca per la virologia, cellule e gli esperimenti di biologia molecolare. La linea cellulare di fibroblasti embrionali del mouse è stato sviluppato da George Todaro e Howard Green nel 1962 alla New York University.

medio

cellule NIH3T3 crescono attaccate ai piatti di plastica in un 37 gradi centigradi incubatore (99 gradi Fahrenheit). La loro crescita media è Modified mezzo di Eagle Dulbecco supplementato con 10% di siero di vitello - non il siero fetale bovino 10% che altre linee cellulari preferite.

Propagazione

Dividere le cellule NIH 3T3 ogni 2 o 3 giorni - è importante che essi non essere permesso di diventare troppo densa. Rimuovere il terreno di coltura esaurito e lavare il piatto con tampone fosfato. Incubare le cellule in tripsina per staccare le cellule e monitorare il distacco con un microscopio. Quando le cellule sono arrotondati e separati, li agitare delicatamente con una pipetta. Aggiungere mezzo di crescita completo per bloccare la reazione enzimatica. Re-piastra le cellule a 300.000 cellule per 10 cm (3,9 pollici) piatto.

usi

NIH3T3 sono utilizzati per far crescere leucemia murina di virus o di una funzione, come cellule immobilizzate, o strati di alimentazione, che forniscono i fattori di crescita necessari per le cellule, come le cellule staminali e cheratinociti. Sono state coltivate su seta di ragno in esperimenti progettati per scoprire biomateriali con un potenziale di rigenerazione dei tessuti.